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化學(xué)發(fā)光凝膠成像儀使用的情況分析概述
  • 發(fā)布日期:2017-05-22     信息來源:      瀏覽次數(shù):2576
    •      化學(xué)發(fā)光凝膠成像儀主要用于蛋白、核酸凝膠成像及分析,系統(tǒng)提供白光和紫外光兩種光源進(jìn)行拍攝凝膠,由系統(tǒng)自帶的圖像捕捉軟件捕捉拍攝圖像,然后由系統(tǒng)自帶的圖像分析軟件對(duì)拍攝的圖像進(jìn)行分析。圖像分析程序,適用于ID膠、斑點(diǎn)/狹縫印跡、平板、菌落、放射自顯影、多排膠、蛋白膠、GFP、PCR、考馬斯亮藍(lán)及銀染的膠及ZYMA膠;可進(jìn)行凝膠圖像分析、克隆計(jì)數(shù)分析、手動(dòng)條帶定量和斑點(diǎn)分析。

          化學(xué)發(fā)光凝膠成像儀主要用于蛋白、核酸凝膠成像及分析,系統(tǒng)提供白光和紫外光兩種光源進(jìn)行拍攝凝膠,由系統(tǒng)自帶的圖像捕捉軟件捕捉拍攝圖像,然后由系統(tǒng)自帶的圖像分析軟件對(duì)拍攝的圖像進(jìn)行分析。
          從整體總的來說化學(xué)發(fā)光凝膠成像儀可應(yīng)用于:蛋白質(zhì)、核酸、多肽、氨基酸、多聚氨基酸等其他生物分子的分離純化結(jié)果作定性分析
          1、分子量定量
          對(duì)于一般常用的DNA膠片,利用分子量定量功能,通過對(duì)膠上DNA Marker條帶的已知分子量注釋,自動(dòng)生成擬合曲線,并以它衡量得到未知條帶的分子量。通過這種方法所得到的結(jié)果較肉眼觀察估計(jì)要準(zhǔn)確很多。
          2、密度定量
          一般常用的測(cè)定DNA(脫氧核糖核酸)和RNA(核糖核酸)濃度的方法是紫外吸收法,但它只能測(cè)定樣品中的總核苷酸濃度,而不能區(qū)分各個(gè)長(zhǎng)度片段的濃度。利用化學(xué)發(fā)光凝膠成像儀系統(tǒng)和軟件,先將DNA膠片上某一已知其DNA含量的標(biāo)準(zhǔn)條帶進(jìn)行密度標(biāo)定以后,可以方便的單擊其他未知條帶,根據(jù)與已知條帶的密度做比較,可以得到未知DNA的含量。此方法也適用于對(duì)PA GE蛋白膠條帶的濃度測(cè)定。
          3、密度掃描
          在分子生物學(xué)和生物工程研究中,我們zui常用到的是對(duì)蛋白表達(dá)產(chǎn)物占整個(gè)菌體蛋白的百分含量的計(jì)算。傳統(tǒng)的方法就是利用的密度掃描,但利用生物分析軟件結(jié)合現(xiàn)在實(shí)驗(yàn)室常規(guī)配備的掃描儀或者直接用白光照射的化學(xué)發(fā)光凝膠成像儀就能完成此項(xiàng)工作。
          4、PCR定量
          PCR定量主要是指,如果PCR實(shí)驗(yàn)擴(kuò)增出來的條帶不是一條,那么可以利用軟件計(jì)算出各個(gè)條帶占總體條帶的相對(duì)百分?jǐn)?shù)。就此功能而言,與密度掃描類似,但實(shí)際在原理上并不相同。PCR定量是對(duì)選定的幾條帶進(jìn)行相對(duì)密度定量并計(jì)算其占總和的百分?jǐn)?shù),密度掃描時(shí)并對(duì)選擇區(qū)域生成縱向掃描曲線圖并積分。

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